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在化學(xué)分析領(lǐng)域中,色譜柱是非常重要的工具,而對于反相色譜分析而言,C18柱是常用的色譜柱之一。正確的使用和維護C18柱能夠有效延長(cháng)其使用壽命,提高分析效果。本文將介紹C18柱的日常使用和維護的注意事項,以幫助化學(xué)分析人員更好地操作和保養C18柱。
首先,在裝卸和更換C18柱時(shí),務(wù)必輕柔操作,并適度擰緊接頭,以避免產(chǎn)生空隙和受到機械振動(dòng)的危害。機械振動(dòng)會(huì )對柱床造成損害,因此要特別注意避免強烈的機械振動(dòng)。其次,針對常規分析實(shí)驗,建議為每一類(lèi)常規分析配置一根專(zhuān)用的C18柱,這樣有助于延長(cháng)柱子的使用壽命。對于常規分析樣品種類(lèi)有限但分析次數較多的情況,專(zhuān)用柱的使用可以很大程度地減少樣品殘留、柱污染等問(wèn)題。
在使用柱溫控制裝置時(shí),應注意在通入流動(dòng)相后再進(jìn)行升溫。這是因為在流動(dòng)相通入之前升溫可能導致柱床收縮和變形,從而影響分離效果。流動(dòng)相使用前需要進(jìn)行脫氣處理,以避免氣泡對柱效和檢測等方面的干擾。同時(shí),樣品溶液也需要經(jīng)過(guò)適當的前處理和過(guò)濾,以減少柱污染和堵塞的可能性。
當更換流動(dòng)相種類(lèi)時(shí),需要注意溶劑的互溶性,以防止發(fā)生鹽析現象。鹽析現象可能會(huì )對柱效和分離效果產(chǎn)生不利影響。實(shí)際操作中,柱子的壓力應低于填裝時(shí)的在高壓力,最好控制在最高壓力的一半以下。通過(guò)在低壓力范圍內使用,可以使柱子保持長(cháng)時(shí)間的高柱效。
C18色譜柱屬于非極性柱,因此流動(dòng)相的pH值應嚴格控制在2~7之間,以避免對柱子的損害。在分析結束后,及時(shí)對色譜分析系統進(jìn)行沖洗,并保持至少0.5小時(shí)以上,以除去色譜柱內的雜質(zhì)。如果流動(dòng)相中含有鹽類(lèi),應首先用水充分清洗。對于胺類(lèi)物質(zhì)(如三 甲胺或四丁基胺),需要使用50%甲醇和0.05%磷酸溶液混合溶劑進(jìn)行沖洗,而不僅僅使用水進(jìn)行清洗。
在柱的存放方面,建議使用100%甲醇作為保存溶劑,以防止柱子干裂損壞。嚴禁將水或緩沖溶液長(cháng)時(shí)間保留在色譜流路中。為了保護分析柱免受雜質(zhì)顆粒和不可逆吸附的干擾,選擇合適的C18保護柱很關(guān)鍵。保護柱內的填料顆粒度應與分析柱的顆粒度盡量一致,以確保流體能夠均勻地通過(guò)柱床,減少干擾物的影響。
對于長(cháng)期不使用的C18柱,保存期不宜過(guò)長(cháng)。對于短期不使用的柱子,可以使用甲醇進(jìn)行沖洗,通常沖洗時(shí)間為30至60分鐘,然后將柱兩端密封。而對于較長(cháng)期不使用的柱子,可以定期進(jìn)行沖洗并密封,或者在沖洗后的柱兩端放置容量適當的裝滿(mǎn)甲醇的容器,以補充柱內溶劑的蒸發(fā)。
綜上所述,正確的使用和維護C18柱對于保證色譜分析的準確性和穩定性至關(guān)重要。通過(guò)輕柔操作、注意流動(dòng)相的選擇和質(zhì)量、定期沖洗和保護柱的使用,可以延長(cháng)C18柱的使用壽命,提高分析效果,并確保色譜分析的成功進(jìn)行?;瘜W(xué)分析人員應該重視C18柱的日常使用和維護,以保證實(shí)驗結果的準確性和可靠性。
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