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C18色譜柱的活化及維護方法

更新時(shí)間:2023-04-23點(diǎn)擊次數:7266

在液相色譜實(shí)驗中,C18色譜柱是常見(jiàn)的一種反相色譜柱。以下是對該柱子進(jìn)行活化和維護的方法:


C18色譜柱的活化及維護方法


1. 活化新柱

  1. 防脫殼處理:將新柱浸入純甲醇或乙腈溶液中,旋轉或以其它方式使其表面完·全接觸至少30分鐘。洗去大部分殘留有機物之后,用純水或75%甲醇或乙腈沖洗2-3次直到輸出液為無(wú)色無(wú)味水平。

  2. 酸堿洗處理:在防脫殼處理完成后,使用0.1-1%的醋酸溶液滴于色譜柱表面并停留約30分鐘,并徹·底用DI水沖洗干凈。然后采用0.1-1%的氨水溶液吸附含氨基的樣品于柱子上并停留約30分鐘,Z后再次用DI水推出至輸出穩定后即可。

  3. 有機物處理:加入摩爾比1:1的異丙醇和甲酸制成的混合液進(jìn)柱子中,在流速為0.5 mL/min的條件下梯度洗脫(10% B, 3min; 40% B, 3min; 95% B, 3min,重置至10%過(guò)渡三分鐘),使其開(kāi)放性自由膠體的更快恢復。

注意,活化步驟而區地直到輸出液為無(wú)色無(wú)味水平,這一點(diǎn)比較關(guān)鍵。如果您在某些步驟中出現了問(wèn)題,例如未完·全去除殘留有機物、洗滌溶劑未嚴格控制等,可能會(huì )影響到Z終結果。因此,對于分析靈敏性和分辨率較高的分析,請盡可能保持每個(gè)步驟的準確性和一致性。

2. 柱子的維護

  1. 保持潔凈:用高純度水、其他常見(jiàn)的有機溶劑進(jìn)行沖洗,去除表面殘留樣品、鹽和溶液等物質(zhì)。

  2. 防止干燥:建議如果長(cháng)期不使用反相色譜柱,注滿(mǎn)一定比例的溶劑并密封。

  3. 正確使用:使用時(shí)應避免太高或太低的流量,以及過(guò)強的壓力。不使用時(shí)封住兩端,避免雜質(zhì)進(jìn)入。

記得,C18色譜柱的使用壽命大約為100~200次,當輸出結果的峰形變得模糊、輸出穩定性下降時(shí),請及時(shí)更換新柱。

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